Đứt gãy DNA tinh trùng: nghiên cứu pha chế bộ xét nghiệm và bước đầu ứng dụng lâm sàng

TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC
51TCNCYH 126 (2) - 2020
Tác giả liên hệ: Nguyễn Thị Trang,
Trường Đại học Y Hà Nội
Email: [email protected]
Ngày nhận: 25/11/2019
Ngày được chấp nhận: 01/04/2019
ĐỨT GÃY DNA TINH TRÙNG: NGHIÊN CỨU PHA CHẾ BỘ XÉT 
NGHIỆM VÀ BƯỚC ĐẦU ỨNG DỤNG LÂM SÀNG
Nguyễn Minh Thu1, Lê Thị Minh Phương1, Nguyễn Ngọc Dũng1, 
Bùi Thị Lành¹, Phạm Quang Anh², Nguyễn Hoàng Long³, 
Lương Thị Lan Anh¹, Hoàng Thu Lan¹, Đoàn Kim Phượng1 
Lê Thị Quyên1 và Nguyễn Thị Trang1, 
1Trường Đại học Y Hà Nội
2Trường THCS và THPT Nguyễn Tất Thành
3Trường THPT chuyên Đại học Sư phạm Hà Nội
Đứt gãy DNA tinh trùng ảnh hưởng trực tiếp đến khả năng sinh sản của nam giới. Đa số bộ kit xác định mức 
độ đứt gãy DNA tinh trùng ở nước ta hiện nay đều phải nhập ngoại với giá thành cao. Do đó chúng tôi tiến hành 
nghiên cứu này với mục đích tự sản xuất bộ kit phục vụ nhu cầu trong nước và bước đầu ứng dụng phương 
pháp này để chẩn đoán nguyên nhân bất thường sinh sản nam, sảy thai, thai lưu và thất bại hỗ trợ sinh sản. 
Mẫu nghiên cứu là tinh dịch của 350 nam giới đến khám sức khỏe sinh sản tại Bệnh viện Đại học Y Hà Nội từ 
tháng 8/2018 đến tháng 8/2019. Đề tài đã hoàn thiện thành công quy trình pha chế bộ xét nghiệm với độ chính 
xác đạt yêu cầu (CV ≤ 5%, ttn< tc), độ nhạy 96,91% và độ đặc hiệu 97,10%. Bộ xét nghiệm cũng có khả năng 
đánh giá mức độ đứt gãy DNA tinh trùng (DFI) tương đương với bộ xét nghiệm thương mại Halosperm (R = 
0,995; p < 0,001). Các phân tích cũng cho thấy DFI có tương quan nghịch với vận tốc và hình thái bình thường 
của tinh trùng(p < 0,01) và có liên quan đến tiền sử sảy thai, thai lưu và thất bại hỗ trợ sinh sản. Đề tài này là 
cơ sở quan trọng để hướng tới ứng dụng rộng rãi xét nghiệm xác định đứt gãy DNA tinh trùng trên lâm sàng.
I. ĐẶT VẤN ĐỀ
Đứt gãy DNA tinh trùng là một trong những 
rối loạn vật chất di truyền dẫn tới khả năng thụ 
tinh kém, thai kém phát triển hoặc dễ sảy thai.1,2 
Theo ước tính, khoảng 25% bệnh nhân nam vô 
sinh có mức độ đứt gãy DNA tinh trùng cao.3 
Ngoài ra, ở những cặp vợ chồng vô sinh, 
đứt gãy DNA tinh trùng còn liên quan đến tiền 
sử sảy thai, thai lưu nếu đứt gãy xảy ra ở các 
vị trí gen liên quan đến làm tổ.4 Chỉ số đứt gãy 
DNA tinh trùng cũng có giá trị rất cao trong việc 
tiên lượng khả năng sinh sản của nam giới, 
giúp lựa chọn phương pháp hỗ trợ sinh sản 
(HTSS) thích hợp và dự đoán tỷ lệ thành công 
của phương pháp hỗ trợ sinh sản đó.5
Trong các phương pháp đánh giá mức độ 
đứt gãy DNA tinh trùng, phổ biến nhất là khảo 
sát mức độ phân tán chất nhiễm sắc của tinh 
trùng (SCD) do Fernandez và cộng sự xây công 
bố năm 2003. Phương pháp này dựa trên sự 
biến tính DNA có kiểm soát để tạo điều kiện cho 
việc loại bỏ các protein có trong mỗi tinh trùng 
thông qua các dung dịch biến tính DNA, dung 
dịch ly giải tách protein màng nhân. Hình ảnh 
của quầng halo được tạo ra sau thí nghiệm cho 
phép đánh giá các mức độ đứt gãy khác nhau 
của DNA tinh trùng. Bộ xét nghiệm thương mại 
Halosperm của hãng Halotech (Tây Ban Nha), 
được xây dựng dựa theo nguyên lý trên và 
được phổ biến rộng rãi ở nhiều bệnh viện, trung 
Từ khóa: DFI, vô sinh nam , sảy thai, thai lưu, hỗ trợ sinh sản, tinh trùng.
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC
52 TCNCYH 126 (2) - 2020
tâm hỗ trợ sinh sản. Tuy nhiên, Việt Nam chưa 
có khả năng tự sản xuất bộ xét nghiệm đứt gãy 
DNA tinh trùng mà phải nhập ngoại hoàn toàn, 
với giá thành khá cao so với mặt bằng chung 
của bệnh nhân. Để góp phần giảm chi phí, đưa 
xét nghiệm đứt gãy DNA tinh trùng đến gần hơn 
với bệnh nhân, chúng tôi tiến hành đề tài " Đứt 
gãy DNA tinh trùng: nghiên cứu pha chế bộ xét 
nghiệm và bước đầu ứng dụng lâm sàng " với 
mục tiêu:
1. Hoàn thiện quy trình pha chế bộ xét 
nghiệm xác định đứt gãy DNA tinh trùng.
2. Sử dụng bộ xét nghiệm xác định đứt gãy 
DNA tinh trùng để đánh giá mối liên quan với 
bất thường sinh sản nam, sảy thai thai lưu, thất 
bại hỗ trợ sinh sản.
II. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP
1. Đối tượng
Mẫu tinh dịch của nam giới đến khám và 
sàng lọc vô sinh có thực hiện xét nghiệm đứt 
gãy DNA tinh trùng tại Trung tâm Tư vấn Di 
truyền, Bệnh viện Đại học Y Hà Nội được lấy 
bằng phương pháp tự thủ dâm vào lọ nhựa vô 
khuẩn sau khi kiêng xuất tinh trong vòng từ 2 
ngày đến 7 ngày. Các mẫu tinh dịch được bảo 
quản ở nhiệt độ thường trong vòng 4 tiếng hoặc 
tại 4oC trong vòng 24h.
Tiêu chuẩn loại trừ 
Nam giới dưới 18 tuổi, mật độ tinh trùng 
dưới 1 triệu/ml, mắc các bệnh HIV, tâm thần và 
không đồng ý tham gia nghiên cứu.
2. Phương pháp
Thời gian và địa điểm nghiên cứu: từ tháng 
8/2018 đến tháng 8/2019 tại Trung tâm Tư vấn 
Di truyền, Bệnh viện Đại học Y Hà Nội.
Phương pháp nghiên cứu: mô tả.
Sơ đồ nghiên cứu: Hình 1: Sơ đồ nghiên cứu
Hoàn thiện quy trình pha chế bộ xét nghiệm (n = 50) 
Thạch Lam kính DD biến tính DD ly giải 
Xác định độ chính xác, độ nhạy, độ đặc hiệu của bộ XN tự pha và so sánh với 
bộ XN thương mại (n = 300) 
Ứng dụng 
Bất thường SS nam (n = 80) Sảy thai, thai lưu (n = 152) Thất bại HTSS (n = 80) 
Hình 1. Sơ đồ nghiên cứu
Chú thích: DD: dung dịch; XN: xét nghiệm; SS: sinh sản; HTSS: hỗ trợ sinh sản
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC
53TCNCYH 126 (2) - 2020
Quy trình xét nghiệm: Mẫu tinh dịch của 
bệnh nhân được sử dụng để làm tiêu bản với 
thạch agarose trên lam kính. Tiêu bản này sẽ 
được xử lý qua dung dịch biến tính, dung dịch 
ly giải, cồn, và thuốc nhuộm. Tiêu bản sau đó 
được đánh giá trên kính hiển vi quang học và 
chỉ số DFI thu được sẽ đặc trưng cho mức độ 
đứt gãy DNA tinh trùng của mỗi bệnh nhân.
3. Đạo đức nghiên cứu
Bệnh nhân được giải thích đầy đủ về quyền 
lợi khi tham gia nghiên cứu và đồng ý tham gia 
nghiên cứu. Tất cả thông tin của bệnh nhân 
được bảo mật hoàn toàn và chỉ phục vụ mục 
đích nghiên cứu.
III. KẾT QUẢ
1. Hoàn thiện quy trình pha chế bộ xét 
nghiệm xác định đứt gãy DNA tinh trùng 
Tối ưu bộ xét nghiệm xác định đứt gãy 
DNA tinh trùng
Các nguyên vật liệu sử dụng trong bộ xét 
nghiệm:
 - Thạch để tạo hỗn hợp với tinh dịch: 70µl 
thạch agarose 0,7%.
 - Lam kính tạo tiêu bản: lam kính phủ thạch 
agarose 0,3%.
 - Dung dịch biến tính: HCl 30%.
 - Dung dịch ly giải: 0,5 M DTT; 2,5 M NaCl; 
0,2 M Tris; 1% Triton X - 100
 - Thuốc nhuộm: Giemsa 30%
Sử dụng 50 mẫu tinh dịch để tối ưu từng 
bước của bộ xét nghiệm bằng cách xác định 
đứt gãy DNA tinh trùng của bệnh nhân song 
song bằng 2 phương pháp: i. Thay đổi từng 
thành phần phản ứng, ii. sử dụng hoàn toàn 
kit Halosperm. So sánh ghép cặp kết quả thu 
được, kết quả không có sự khác biệt có ý 
nghĩa thống kê giữa kết quả đứt gãy DNA tinh 
trùng làm bằng bộ xét nghiệm tự pha với bộ 
xét nghiệm Halosperm với độ tin cậy 95% (p = 
0,154 - 0,572 > 0,05).
Xác định độ chính xác bộ xét nghiệm tự pha
Độ chụm
Độ chụm mô tả mức độ dao động của các 
kết quả thử nghiệm độc lập quanh trị giá trung 
bình trong các điều kiện khác nhau (kỹ thuật 
viên, dụng cụ, phòng thí nghiệm...). Xác định 
mức độ đứt gãy DNA tinh trùng của một mẫu 
bằng bộ xét nghiệm tự pha lặp lại 10 lần, kết 
quả thu được CV% = 2,62 - 4,87% ≤ 5%.
 Bảng 1. Độ chính xác của bộ xét nghiệm đánh giá mức độ đứt gãy DNA tinh trùng tự pha chế
1a Độ lặp lại
Độ chụm 
trung gian
Độ tái lập
Giá trị trung bình 14,92 24,05 7,36
SD 0,391 0,686 0,359
CV% 2,62% 2,85% 4,87%
1b Kit thương mại Kit tự pha
DFI (%) 14,8 14,92
SD
0,391
Bảng 1a: Kiểm định độ chụm 
Bảng 1b: Kiểm định độ đúng
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC
54 TCNCYH 126 (2) - 2020
Độ đúng
Độ đúng chỉ mức độ gần nhau giữa các giá trị trung bình của kết quả thử nghiệm và giá trị thực 
hoặc giá trị được chấp nhận là đúng. Xác định mức độ đứt gãy DNA tinh trùng lặp lại 10 lần, so sánh 
với kết quả được xác định bởi bộ kit Halosperm, tính được ttn = 0,971 < tc (tra bảng tc = 2,262). 
Độ nhạy và độ đặc hiệu
Đánh giá độ phân mảnh DNA tinh trùng của 300 mẫu tính dịch song song bằng 2 phương pháp: 
bằng bộ xét nghiệm tự pha và bộ xét nghiệm thương mại Halosperm thu được kết quả như Bảng 2.
Bảng 2. Độ nhạy và độ đặc hiệu của bộ xét nghiệm tự pha chế
Chỉ số Kết quả
Số kiểm nghiệm dương tính thật 162
Số kiểm nghiệm dương tính giả 2
Số kiểm nghiệm âm tính thật 131
Số kiểm nghiệm âm tính giả 5
Từ đó, chúng tôi tính độ nhạy của bộ xét nghiệm tự pha là 96,91% và độ đặc hiệu 97,10%
So sánh bộ xét nghiệm tự pha và bộ xét nghiệm Halosperm
So sánh kết quả đứt gãy DNA tinh trùng của 300 mẫu tinh dịch trên bằng hai phương pháp, tính 
được hệ số tương quan Pearson = 0,995 với p < 0,001; chứng tỏ kết quả thu được giữa 2 phương 
pháp có sự tương quan mạnh và có ý nghĩa. So sánh T - test cũng cho kết quả xét nghiệm thu được 
từ 2 phương pháp không có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% (p = 0,236 > 0,05). 
Bảng 3. Kiểm định Pearson và t - test
N 300
Hệ số tương quan Pearson 0,995
p < 0,001
Khoảng tin cậy 95 %
Giới hạn trên 0,996
Giới hạn dưới 0,994
t p Trung bình sự khác biệt
Khoảng tin cậy 95%
Giới hạn dưới Giới hạn trên
1,187 0,236 - 0,010 - 0,003 0,011
Biểu đồ Bland Atlman cũng cho thấy khác biệt trung bình giữa 2 phương pháp là rất nhỏ (0,042). 
Đa số khác biệt nằm trong giới hạn ± 1,96 SD. 
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC
55TCNCYH 126 (2) - 2020
Biểu đồ 1. Biểu đồ Bland - Atlman
2. Liên quan đứt gãy DNA tinh trùng với 
bất thường sinh sản nam, sảy thai thai lưu, 
thất bại hỗ trợ sinh sản
Liên quan đứt gãy DNA tinh trùng và bất 
thường sinh sản nam
Trong 80 bệnh nhân nam giới được chẩn 
đoán vô sinh được làm tinh dịch đồ và xác định 
đứt gãy DNA tinh trùng, 36 trường hợp có tinh 
dịch đồ bình thường theo WHO 2010 chiếm 
45%. Đứt gãy DNA tinh trùng có mối tương 
quan với tỉ lệ di động tiến tới, vận tốc trung bình, 
bất thường hình thái (p = 0,003 - 0,008 < 0,01) 
tuy nhiên mức độ tương quan chỉ ở mức thấp. 
Đặc biệt 23,75% nam giới vô sinh có chỉ số tinh 
dịch đồ hoàn toàn bình thường nhưng có mức độ 
đứt gãy DNA tinh trùng ở mức trung bình và cao.
Liên quan đứt gãy DNA tinh trùng và sảy 
thai thai lưu
Trên 152 người chồng trong các cặp vợ 
chồng có tiền sử sảy thai, thai lưu, đứt gãy 
DNA tinh trùng chủ yếu thuộc nhóm trung bình 
và cao (DFI 15 - 30%: 40,8% và DFI > 30%: 
39,5%). Số lần sảy thai, thai lưu của người vợ 
có mối tương quan tỷ lệ thuận với mức độ đứt 
gãy DNA tinh trùng người chồng (p < 0,05).
Liên quan đứt gãy DNA tinh trùng và thất 
bại hỗ trợ sinh sản
Trên 80 bệnh nhân nam giới thất bại trong 
hỗ trợ sinh sản, DFI trung bình là 34,0 ± 24,9 
(%). Trong đó chủ yếu bệnh nhân nam có mức 
độ đứt gãy DNA tinh trùng trung bình hoặc cao 
(DFI 15 - 30% : 39%, DFI > 30%: 40%). Có sự 
khác biệt có ý nghĩa về DFI ở nam giới thất bại 
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC
56 TCNCYH 126 (2) - 2020
HTSS trên 2 lần nam giới thất bại HTSS ≤ 1 lần 
(p < 0,05).
IV. BÀN LUẬN
Hoàn thiện quy trình pha chế bộ xét nghiệm 
xác định đứt gãy DNA tinh trùng
Xuất phát từ thực tế là các kĩ thuật hỗ trợ 
sinh sản đều rất tốn kém, nỗ lực tự sản xuất 
các bộ xét nghiệm với chất lượng tốt, hướng tới 
chăm sóc tốt hơn cho bệnh nhân là cần thiết. 
Bộ xét nghiệm của chúng tôi có ưu điểm là sử 
dụng các nguyên vật liệu sẵn có trong nước, 
không yêu cầu các trang thiết bị đắt tiền. Có 
hai cải tiến lớn trong bộ xét nghiệm này so với 
các tác giả trước đây. Một là giảm được thể 
tích DTT dùng trong dung dịch ly giải xuống 4 
lần nhưng vẫn đảm bảo kết quả. Đây là bước 
quan trọng nhất để giảm giá thành xét nghiệm, 
vì DTT rất đắt. Việc này cũng làm giảm sự khó 
chịu khi thao tác cho kỹ thuật viên, do mùi của 
DTT rất nồng. Thứ hai là thay vì sử dụng SDS 
như các tác giả Nguyễn Thị Thúy An (2014)⁷ có 
nguy cơ gây mất đuôi tinh trùng số lượng lớn; 
chúng tôi sử dụng Triton X - 100 là dung dịch 
trung tính, có khả năng ly tách protein nhưng 
không làm biến tính protein của đuôi tinh trùng, 
giúp phân biệt được tinh trùng với các tế bào 
có nhân khác như bạch cầu, vi khuẩn có trong 
tinh dịch. 
Kết quả xét nghiệm của bộ xét nghiệm tự 
pha với các tiêu chí về độ chính xác, độ nhạy 
và độ đặc hiệu đều đạt yêu cầu của một bộ 
xét nghiệm định lượng. Kết quả xác định đứt 
gãy DNA tinh trùng bằng bộ xét nghiệm tự pha 
so với bộ xét nghiệm thương mại Halosperm 
có tương quan mạnh, sự khác biệt là rất nhỏ, 
sai số hoàn toàn do ngẫu nhiên và không ảnh 
hưởng đến kết quả của bệnh nhân.
Liên quan đứt gãy DNA tinh trùng với bất 
thường sinh sản nam, sảy thai thai lưu, 
thất bại hỗ trợ sinh sản
Liên quan đứt gãy DNA tinh trùng với bất 
thường sinh sản nam
Đứt gãy DNA tinh trùng có tương quan thuận 
với bất thường hình thái, trong khi có tương 
quan nghịch với khả năng di động cũng như tốc 
độ di động của tinh trùng. Kết quả này tương 
đồng với các tác giả Cassuto N.G. (2012),8 cho 
thấy đứt gãy DNA tinh trùng chính là yếu tố dẫn 
đến suy giảm chất lượng tinh trùng, là nguyên 
nhân của bất thường sinh sản nam.
Đặc biệt, có đến 23,75% bệnh nhân có tinh 
dịch đồ hoàn toàn bình thường nhưng mức độ 
đứt gãy ADN trung bình hoặc cao. Đây là một 
cơ sở để chúng tôi tiến đến khuyến cáo xét 
nghiệm đứt gãy DNA tinh trùng thường quy ở 
những bệnh nhân vô sinh nam bên cạnh xét 
nghiệm cơ bản là tinh dịch đồ.
Liên quan đứt gãy DNA tinh trùng với sảy 
thai thai lưu
Trong nghiên cứu, nam giới mà vợ chồng có 
tiền sử sẩy thai, thai lưu, tỷ lệ đứt gãy DNA tinh 
trùng mức độ trung bình và cao chiếm chủ yếu 
(80,3%). Đặc biệt ở nhóm sẩy thai > 2 lần, 100% 
trường hợp BN thuộc nhóm đứt gãy trung bình 
và cao. Kết quả này tương đồng với Calini T. và 
cs (2017),9 Phạm Thị Xuân (2016).10 Đứt gãy 
DNA gây tổn thương bộ máy di truyền làm giảm 
khả năng tham gia tạo hợp tử của tinh trùng và 
gây đột biến nên tăng tỷ lệ sảy thai, thai lưu.
Liên quan đứt gãy DNA tinh trùng với thất 
bại hỗ trợ sinh sản
Cơ hội đậu thai giảm đi đáng kể ở những 
bệnh nhân có mức độ đứt gãy DNA tinh trùng 
cao. Nghiên cứu của các tác giả Avendano và 
cs (2009) cũng chỉ ra rằng khi mức DFI trên 
20%, tỉ lệ có thai tự nhiên giảm dần và gần như 
bằng không khi DFI ở mức 30 - 40%.11 Khi DFI 
> 30%, bệnh nhân cần được chỉ định làm các 
biện pháp hỗ trợ sinh sản như IVF/ICSI. Do đó 
giá trị của DFI được xem như là một yếu tố tiên 
lượng khả năng mang thai, giúp các bác sỹ lựa 
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC
57TCNCYH 126 (2) - 2020
chọn phương pháp hỗ trợ sinh sản phù hợp cho 
bệnh nhân.
V. KẾT LUẬN
Hoàn thiện thành công quy trình pha chế bộ 
xét nghiệm xác định đứt gãy DNA tinh trùng với 
độ chính xác, độ nhạy, độ đặc hiệu đạt yêu cầu 
và cho kết quả chính xác tương đương bộ xét 
nghiệm thương mại. Bộ xét nghiệm tự pha 
hoàn toàn có đủ khả năng có thể lưu hành trên 
thị trường.
Đứt gãy DNA tinh trùng có mối liên quan 
các bất thường sinh sản ở nam giới, tiền sử 
sảy thai, thai lưu và thất bại hỗ trợ sinh sản, tuy 
nhiên vẫn cần tiến hành các nghiên cứu với cỡ 
mẫu lớn hơn và phương pháp nghiên cứu phù 
hợp để làm rõ hơn các mối liên quan này.
Lời cám ơn
Chân thành cám ơn Bộ môn Y sinh học Di 
truyền, Trường Đại học Y Hà Nội đã giúp đỡ 
chúng tôi thực hiện nghiên cứu này. Nghiên 
cứu không có xung đột lợi ích với các tác giả 
khác.
TÀI LIỆU THAM KHẢO 
1. Sheena E., Lewis M., John A.R. The 
impact of sperm DNA damage in assisted 
conception and beyond: recent advances 
in diagnosis and treatment. Reproductive 
Biomedicine Online. 2013;27(4):525 - 337.
2. Erenpresis J., Spano M., Erenpreisa 
J., et al . Sperm chromatin structure and male 
fertility: biological and clinical aspects. Asian J 
Androl. 2006;8:11 - 29.
3. Agarwal A., Said T.M. Role of sperm 
chromatin abnormalities and DNA damage 
in male infertility. Hum Reprod Update. 
2003;9(4):331 - 345.
4. Sharma R.K., Said T., Agarwal A. 
Sperm DNA damage and its clinical relevance 
in assessing reproductive outcome. Asian J 
Androl. 2004;6:139 - 148.
5. Duran E.H., Morshedi M., Taylor S., 
et al . Sperm DNA quality predicts intrauterine 
insemination outcome: a prospective cohort 
study. Hum Report. 2002;17:3122 - 3128.
6. Fernandez J. L., Muriel L., Rivero M. T., 
et al . The sperm chromatin dispersion test: a 
simple method for the determination of sperm 
DNA fragmentation. J Androl. 2003;24(1):59 - 
66.
7. Nguyễn Thị Thúy An. Kết quả so 
sánh chỉ số phân mảnh DNA tinh trùng bằng 
kit Halosperm và quy trình SCD xây dựng tại 
Trung tâm Nghiên cứu Di truyền và Sức khỏe 
Sinh sản. Khoa Y, Đại học Quốc gia TPHCM, 
Hội nghị IVF EXPERTS MEETING 10, Vũng 
Tàu. 2014.
8. Cassuto N. G., Hazout A., Hammoud 
I., et al . Correlation between DNA defect 
and sperm - head morphology. R Bio Onl. 
2012;24(2):211 - 218.
9. Carlini T., Paoli D., Pelloni M., al e. 
Sperm DNA fragmentation in Italian couples 
with recurrent pregnancy loss. R Bio Onl. 
2017;34(1):58 - 65.
10. Phạm Thị Xuân. Đánh giá sự đứt gãy 
ADN của tinh trùng nam giới trong các cặp vợ 
chồng sảy thai, thai lưu. Luận văn tốt ngiệp bác 
sỹ đa khoa, Đại học Y Hà Nội. 2016.
11. Avendano C., Franchi A., Taylor S., et 
al. Fragmentation of DNA in morphologically 
normal human spermatozoa. Fertil Steril. 
2009;91(4):1077 - 1084.
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC
58 TCNCYH 126 (2) - 2020
Summary
SPERM DNA FRAGMENTATION: RESEARCH ON PRODUCING 
TEST KIT AND CLINICAL APPLICATION
Sperm DNA fragmentation directly affects reproductive health. Most kits for determining the 
level of sperm DNA fragmentation in our country today have to be imported with high prices. 
Therefore, we conducted this research with the purpose of producing a kit for domestic needs 
and determine DFI relationship with male reproductive abnormalities, miscarriage, stillbirth 
an assisted reproductive failure. The sample was the semen of 350 men who had reproductive 
health examination at Hanoi Medical University Hospital from August 2018 to August 2019. 
The research has successfully completed the production process of DFI test kit with satisfied 
accuracy (CV ≤ 5%, ttn < tc), sensitivity of 96.91% and specificity of 97.10%. The ability to 
evaluate DFI is similar to the commercial Halosperm kit (R = 0.995; p < 0.001). The research 
also showed that DFI was negatively correlated with normal sperm motility and morphology (p < 
0.01) and was associated with a history of miscarriage, stillbirth, and assisted reproductive failure. 
Keywords: DFI, male infertility miscarriage, stillbirth a assisted reproductive failure, sperm.